細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
?
產(chǎn)品名稱 | 小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞 |
英文名稱 | EOMA |
規(guī)格 | 詳見說明 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
腺苷酸環(huán)化酶9抗體
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0901水合萜品500克
BAMBI Others Human 人 BAMBI / NMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-D-天冬酰胺 Fmoc-D-Asn-OH,≥98.0% 108321-39-7 1G 通用試劑
CM-M095小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL典醋 Iodic ccid 778-68-2
KLK1 Others Mouse 小鼠 KLK1 / Kallikrein 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 波爾頓選擇性增菌肉湯100毫升
星形細(xì)胞培養(yǎng)基SteCM-prf1516-08-1氘代乙醇-DETHANOL-D6
TIMD4 Others Human 人 TIMD4 / TIM4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氯美扎酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Chlormezanone質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查
BHK 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞1酸氫鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Calcium hydrogenphosphate dihydrate質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定
CL-0158MGC80-3(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2磺胺二甲嘧啶 (標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfamethazine質(zhì)量規(guī)格:含量測定
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞磺胺脒(標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfaguanidine質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM1 人尿道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL芬布芬(標(biāo)準(zhǔn)品)Fenbufen質(zhì)量規(guī)格:含量測定
小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞GAD1 Others Human 人 GAD67 / GAD1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-萘酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品1-Naphthol
恒河猴腎細(xì)胞;RM-3N-二乙基亞硝胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品N-Nitrosodiethylamine
COS-1細(xì)胞,SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞 人大腸癌細(xì)胞,PA319細(xì)胞 CM-R005大鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL油酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC) Oleic acid
大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)反式-9-十八1酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品trans-9-Octadecenoic methyl ester
CD200 Others Human 人 CD200 / OX-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 對位紅(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于食品分析 Para Red
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。公司產(chǎn)品僅用于科研,不得用于臨床