全自動(dòng)型生物分子相互作用分析系統(tǒng)
品牌介紹:
Nicoyalife成立于2014年,是滑鐵盧大學(xué)科技孵化器重點(diǎn)培養(yǎng)的納米科技公司,并獲得加拿大政府創(chuàng)新資金支持。Nicoyalife致力于納米光子學(xué)基礎(chǔ)上的傳感器技術(shù)研究,并推出創(chuàng)新的ILSPR技術(shù)*,為基礎(chǔ)研究,藥物研發(fā)及醫(yī)學(xué)診斷提供高靈敏的蛋白及分子互作分析儀器。美國(guó)號(hào): US8693003 B2
全自動(dòng)型生物分子相互作用分析系統(tǒng)
產(chǎn)品介紹:
OpenSPR-XT將為科研及工業(yè)用戶帶來(lái)一款全自動(dòng),高通量的分子binding動(dòng)力學(xué)SPR分析儀,大大加速用戶的研發(fā)過(guò)程。OpenSPR突出的性能和吸引力的價(jià)格,將*目前的全自動(dòng)SPR市場(chǎng)。
OpenSPR-XT擁有*的納米傳感器技術(shù),以廣受贊譽(yù)的OpenSPR作為檢測(cè)基礎(chǔ),結(jié)合自動(dòng)化工作站,提供高質(zhì)量的分子互作數(shù)據(jù),如binding動(dòng)力學(xué),吸附和蛋白,抗體,核酸,小分子等的特異性
應(yīng)用舉例:
多肽和鈣調(diào)蛋白結(jié)合動(dòng)力學(xué)分析
鈣調(diào)蛋白CaM是一種能與鈣離子結(jié)合的蛋白質(zhì)。OpenSPR用來(lái)檢測(cè)野生型CaM和NOS肽的結(jié)合、解離速率及親和力。使用TraceDrawer 軟件處理數(shù)據(jù),解離速率Koff:3.34x10-4 s-1 結(jié)合速率Kon 1.56x105M-1s-1、親和力常數(shù)KD 2.20 nM。結(jié)果與之前文獻(xiàn)報(bào)道的親和力常數(shù)相符。
前列腺特異抗原(PSA) 和抗體 (anti-PSA) 高親和力相互作用動(dòng)力學(xué)分析
在很多研究領(lǐng)域中需要測(cè)定抗原-抗體結(jié)合動(dòng)力常數(shù)。OpenSPR 方便用戶更準(zhǔn)確測(cè)定配體-抗原的結(jié)合動(dòng)力學(xué)。OpenSPR用來(lái)測(cè)定前列腺特異抗原(prostate specific antigen ,PSA) 和抗體 (anti-PSA)的相互作用。PSA結(jié)合數(shù)據(jù)動(dòng)力學(xué)擬合,得到解離速率Koff和結(jié)合速率Kon分別為
1.8x10-4 (+/-2.1x10-6) s-1,4.03x104(+/-9.16x102) M-1s-1,親和力KD為4.5nM.如圖1和圖2,與之前文獻(xiàn)報(bào)道的PSA和anit-PSA相互作用數(shù)據(jù)*。
由于相互作用解離速率慢,需要進(jìn)行單獨(dú)的解離實(shí)驗(yàn)。分3次加入300nM PSA,平均反應(yīng)為70pm +/-2.3pm, 傳感器反應(yīng)的重復(fù)性為 CV =3.2% 如右圖。
以上結(jié)果表明 OpenSPR可以準(zhǔn)確測(cè)定抗原抗體相互作用的動(dòng)力學(xué)速率。
SPR分析-鏈霉親和素相互作用
鏈霉親和素streptavidin 和 biotin 的結(jié)合結(jié)果總結(jié)在Table 1 和 Figure 1中。當(dāng)streptavidin流過(guò)化的傳感器表面,存在顯著濃度依賴(lài)。由于streptavidin 和 biotin結(jié)合的高親和力,沒(méi)有觀察到解離過(guò)程。 1 nM低濃度時(shí)(18 pm response)觀察到表明OpenSPR儀器的高靈敏性。1min內(nèi)信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)方差小于 2 pm,揭示了優(yōu)異的信噪比。
對(duì)照實(shí)驗(yàn)(Figure 2) 表明沒(méi)有biotin結(jié)合到表面上時(shí), 500 nM 和 1000 nM時(shí),streptavidin結(jié)合很少。然后用biotin激活表面,觀察到streptavidin結(jié)合。確認(rèn)傳感器是有活力的。
Streptavidin和金顆粒非特異結(jié)合,但running buffer的組成可以有效抑制任何非特異結(jié)合。
這些結(jié)果表明biotin-streptavidin 對(duì)于 OpenSPR系統(tǒng)使用者來(lái)說(shuō)是個(gè)很優(yōu)異的分析體系。
技術(shù)參數(shù)
流動(dòng)池 | PDMS,3μl |
傳感器 | 納米金粒子 |
泵流速 | 20-150μl/min |
靈敏度 | 5pg/mm2 |
自動(dòng)化 | 全自動(dòng) |
RI分辨率 | 10-4-10-5RIU |
折射指數(shù)范圍 | 任意 |
RI DRIFT/5min | 10-5 RIU |
溫度靈敏度 | 10-5 RIU/℃ |
加樣 | 20-4500μl |
溫度 | 室溫 |
通道 | 單通道 |
濃度范圍 | 0.1nM-1mM |
分析軟件 | TraceDrawer |
儀器尺寸 | 30×55×53cm |