細菌新型生化鑒定管使用說明
――071740 沙門氏菌生化鑒定盒(10種×10次)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應的10種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)
所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
注意:生化管,應盡量將膠塞套緊,以免揮發(fā)造成假陽性!(如果發(fā)現(xiàn)生化鑒定管的顏色由淺黃色變?yōu)樯詈稚?/p>
或黑色即為變質,不能繼續(xù)使用)
三)沙門氏菌生化鑒定盒的詳細使用方法
沙門氏菌為需氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌,有動力,有周鞭毛(但有無動力的變種),溫度為37℃,pH為7.2~7.6,
在固體培養(yǎng)基上37℃ 24h菌落可呈中等大小,光滑,圓形,濕潤,隆起,在液體培養(yǎng)基內生長均勻渾濁。挑取平板分離的可疑菌
落直接進行三糖鐵瓊脂和營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng),將可疑菌落置于已配備的無菌生理鹽水,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內托的凹槽內(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結果觀察見表1。
注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式,請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
四)沙門氏菌生化鑒定特征
自選擇性瓊脂平板上直接挑取數(shù)個可疑菌落,分別接種三糖鐵瓊脂在三糖鐵瓊脂內,腸桿菌科常見屬種的反應結果見表2
表2說明在三糖鐵瓊脂內斜面產(chǎn)酸,底層產(chǎn)酸,同時賴氨酸脫羧酶試驗陰性的菌株可以排除,其它的反應結果均有沙門氏菌
的可能,同時也均有不是沙門氏菌的可能。
在接種三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基的同時,可直接接種蛋白胨水(供靛基質試驗)、尿素瓊脂(PH7.2)、
培養(yǎng)基,也可在初步判斷結果后從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落接種,于36±1℃培養(yǎng)18~24小時,必要時可延長至48小時,
按表3判定結果。將已挑菌落的平板儲存于2℃~5℃或室溫至少保留24h,以備必要時復查。