磷脂酰液相色譜儀檢測方案所用試劑
甲醇:色譜純。
異丙醇:色譜純。
正己烷,色譜純。
冰醋酸:分析純。
三乙胺:分析純
去離子水
磷脂酰標(biāo)準(zhǔn)液
溶液的制備
對照品儲備液的制備:精密稱取磷脂酰標(biāo)準(zhǔn)品0.05g(準(zhǔn)確至0.0001g),置于50ml容量瓶中,加甲醇與三LU甲烷的混合溶液溶解并稀釋至刻度,配成1mg/mL的磷脂酰標(biāo)準(zhǔn)儲備液,置-6℃下冷藏。
標(biāo)準(zhǔn)曲線系列濃度配置:朱雀吸取上述儲備液各1mL、2mL、4mL、8mL,分別置于10mL容量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻,配成濃度分別為0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL及0.8mg/mL的磷脂酰溶液,用0.45um微孔濾膜過濾,待用。
供試品溶液的制備:根據(jù)樣品中磷脂酰的含量,準(zhǔn)確稱取試樣10mg~50mg,用流動相溶解,超聲處理15min,并用流動相稀釋至10ml。
儀器設(shè)備
LC-10Tvp高效液相色譜儀
Sepax HP-Silica 色譜柱:250mm×4.6mm×5μm
分析天平
恒溫箱,溫度控制在100±1℃
微量進(jìn)樣器,(100μL)一支
漩渦混勻器
針頭過濾器
微孔濾膜:0.45µm
磷脂酰液相色譜儀檢測方案儀器配置
高壓 | 0.001-9.999ml/min | 1臺 |
紫外檢測器 |
| 1臺 |
手動進(jìn)樣閥 | 含觸發(fā)開關(guān) | 1套 |
閥安裝支架 |
| 1套 |
液相色譜柱 | Silica柱 | 1支 |
微量進(jìn)樣器 | 100uL | 1支 |
維護(hù)工具包 | 液相色譜啟動工具 | 1套 |
色譜工作站 | N2000 | 1套 |
超聲波清洗機(jī) |
| 1套 |
真空抽濾裝置 | 帶真空泵 | 1套 |
色譜條件
Silica色譜柱:4. 6 mmx250 mm,粒度5 µm
流動相A:甲醇:水:冰醋酸:三乙胺 = 85:15:0.45:0.05
流動相B:正己烷:異丙醇:A = 10: 40: 50
波長:205nm
流速:1. 0 mL/min
柱溫:40℃
測定法
分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20ul,注入液相色譜儀,測定,即得
標(biāo)準(zhǔn)品譜圖
樣品譜圖