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肌酸激酶(CK)試劑盒,微板法

參考價	￥690.00-￥1200.00

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公司名稱上海宇淳生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號
所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時間2024/6/20 15:22:27
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肌酸激酶(CK)試劑盒微板法

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上海宇淳生物科技有限公司是一家致力于生物技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)試劑和耗材銷售，有專業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)人員。承接免疫學(xué)、分子學(xué)、細(xì)胞學(xué)、病理學(xué)、動物造模等技術(shù)實(shí)驗(yàn)，可為高校醫(yī)院及科研單位提供包括病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、動物實(shí)驗(yàn)等技術(shù)服務(wù)，并建立了包含實(shí)驗(yàn)設(shè)計項(xiàng)目實(shí)施結(jié)果整理數(shù)據(jù)分析及策略咨詢等一站式的科研服務(wù)。本公司還代理許多先進(jìn)水平的產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得*好評。特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價格實(shí)惠。主營產(chǎn)品/服務(wù):試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒。細(xì)胞：美國*原代細(xì)胞，細(xì)胞系，細(xì)胞株，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，耗材：細(xì)胞培養(yǎng)耗材、普通實(shí)驗(yàn)耗材。生化試劑：*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑。抗體：進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等等。公司的理念是：為您提供*的產(chǎn)品及服務(wù)，產(chǎn)品價格較好的競爭力。

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sigma試劑，核酸染料試劑，熒光定量PCR試劑，活體成像試劑，熒光探針試劑，細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒，超敏ECL發(fā)光液，細(xì)胞染色試劑，吸頭

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肌酸激酶(CK)試劑盒,微板法
肌酸激酶（CK，EC 2.7.3.2）主要存在于心臟、肌肉及腦等組織中，能可逆地催化肌酸與 ATP 之間的轉(zhuǎn)磷?；磻?yīng)

肌酸激酶(CK)試劑盒,微板法產(chǎn)品信息

肌酸激酶(CK)試劑盒,微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 肌酸激酶（Creatine Kinase, CK）測定試劑盒說明書（貨號:WS5580W 微板法 96 樣）一、產(chǎn)品簡介：肌酸激酶（CK，EC 2.7.3.2）主要存在于心臟、肌肉及腦等組織中，能可逆地催化肌酸與 ATP 之間的轉(zhuǎn)磷酰基反應(yīng)，在能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮和 ATP 再生中有重要作用。 CK 催化磷酸肌酸和 ADP 生成肌酸和 ATP，通過添加的己糖激酶與 6-磷酸葡萄糖脫氫酶復(fù)合體，依次催化 ATP 的水解與并伴隨著 NADPH 的生成，通過檢測 NADPH 在 340nm 處吸光值的增加即可得出 CK 酶活性的大小。二、試劑盒的組成和配制：試劑名稱規(guī)格保存要求備注提取液液體 100mL×1 瓶 4℃保存試劑一粉劑×1 支 4℃保存臨用前甩幾下，使粉劑落到底部，再加 1.1mL 蒸餾水充分溶解。試劑二粉劑×1 支 -20℃保存臨用前甩幾下，使粉劑落到底部，再加 1.1mL 蒸餾水充分溶解。試劑三液體 16mL×1 瓶 4℃保存試劑四粉劑×4 支 4℃保存臨用前甩幾下，使粉劑落到底部，每支加 0.3mL 蒸餾水充分溶解。三、所需的儀器和用品：酶標(biāo)儀、96 孔板天平、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液器、恒溫培養(yǎng)箱、研缽。四、肌酸激酶（CK）活性測定：建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： ① 組織樣本：稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，轉(zhuǎn)移至 EP 管中，12000rpm, 4℃ 離心 10min，取上清，置冰上待測。【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取。 ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（104）：提取液(mL)為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁則離心后取上清檢測。 2、上機(jī)檢測： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，設(shè)定溫度至 37℃，調(diào)節(jié)波長至 340nm。 ② 所有試劑可預(yù)先在 37℃條件下預(yù)溫 5min，在 96 孔板中依次加入：試劑名稱（μL）測定管樣本 20 試劑一 10 試劑二 10 試劑三 150本試劑盒僅供科研使用 2 【注】1.若 A 測定大于 1.5，則可減少反應(yīng)時間 T（如減至 10min）再讀取 A2，或減少樣本加樣量 V1 （如減至 5μL, 則試劑三相應(yīng)增加）,則改變后的 T 和 V1 需代入計算公式重新計算。 2.若△A 的值小于 0.01，則可增大樣本體積 V1（如增至 80μL 或更多，則試劑三相應(yīng)減少），或延長反應(yīng)時間 T（如增至 30min 或更長），則改變后的 T 和 V1 需代入計算公式重新計算。五、結(jié)果計算： 1、按組織蛋白含量計算：定義：37℃條件下，每毫克蛋白質(zhì)在每分鐘內(nèi)催化產(chǎn)生 1nmoL NADPH 為一個酶活單位。 CK 活性(nmoL/min/mg prot)=[ΔA÷(ε×d)×V2×109]÷(V1×Cpr)÷T=214.4×ΔA÷Cpr 2、按組織樣本質(zhì)量計算：定義：37℃條件下，每克樣品在每分鐘內(nèi)催化產(chǎn)生 1nmoLNADPH 為一個酶活單位。 CK 活性(nmoL/min/g 鮮重)=[ΔA÷(ε×d)×V2×109]÷(V1÷V×W)÷T=214.4×ΔA÷W 3、按細(xì)胞數(shù)量計算：定義：37℃條件下，每 104個細(xì)胞每分鐘內(nèi)催化產(chǎn)生 1nmoLNADPH 為一個酶活單位。 CK 活性(nmoL/min/104 cell)=[(ΔA÷(ε×d)×V2×109]÷(500×V1÷V)÷T=0.43×ΔA 4、按液體體積計算：定義：37℃條件下，每毫升液體在每分鐘內(nèi)催化產(chǎn)生 1nmoLNADPH 為一個酶活單位。 CK 活性(nmoL/min/mL)=[ΔA÷(ε×d)×V2×109]÷V1÷T=214.4×ΔA V---加入提取液體積，1 mL； V1---加入樣本體積，0.02mL； V2---反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L； d---96 孔板光徑，0.5cm； ε---NADPH 摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L/moL/cm； W---樣本質(zhì)量，g； T---反應(yīng)時間，15min； Cpr---蛋白濃度（mg/mL），建議使用本公司的 BCA 蛋白含量測定試劑盒。 37℃條件下孵育 20min，試劑四 10 混勻，37℃條件下，立即于 340nm 處讀取 A1，15min 后讀取 A2，△A= A2-A1。