產(chǎn)品名稱:兔椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞
英文名稱:Rabbit Intervertebral Disc Fibroblast Cells
組織來源:椎間盤組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
兔椎間盤纖維環(huán)分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個(gè)密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚,而后側(cè)較薄。纖維環(huán)的前部有強(qiáng)大的前縱韌帶,后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細(xì)胞密度為9000個(gè)細(xì)胞/mm3,其外層的細(xì)胞呈梭型,主要屬于纖維細(xì)胞,內(nèi)層細(xì)胞呈圓形,主要屬于軟骨細(xì)胞。在培養(yǎng)的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn),它們的核較圓,核仁較明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級(jí)深酶體和次級(jí)深酶體。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復(fù)合體和分泌顆粒,纖維環(huán)細(xì)胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環(huán)生理代謝活動(dòng)所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少,纖維環(huán)的生物性能就會(huì)減弱,椎間盤開始退變。
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔椎間盤纖維環(huán)采用膠原酶-聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔椎間盤纖維環(huán)經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
取材→分離→培養(yǎng)和維持
1、取材
人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鮮和保鮮
② 應(yīng)嚴(yán)格無菌
③ 防止機(jī)械損傷
④ 去除無用組織和避免干燥
⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等
⑥ 作好記錄
2、分離
人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密,不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖,必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開,使細(xì)胞解離出來。
(1)懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
(2)實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
① 機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
② 消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
豬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬內(nèi)皮型合酶(eNOS)試劑盒
Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素
血液S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活酶動(dòng)力性比色法定量試劑盒20次
PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒
CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發(fā)動(dòng)蛋白2抗體
BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發(fā)動(dòng)蛋白2抗體
ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白
BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
兔椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞大鼠活化素A受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)試劑盒 ,英文名: ACV-RAb IgM ELISA Kit
Rabbit pyridinium crosslinks (PY) ELISA Kit 兔交聯(lián)物(PY)試劑盒
桿菌(BA)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽
體液元素?zé)晒舛吭噭┖?span>20次
ELISAKitPⅢNP人Ⅲ型前膠原肽