您好, 歡迎來(lái)到環(huán)保在線! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
本試劑僅供研究使用
試驗(yàn)原理:
caspase-3 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知caspase-3 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將caspase-3 和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中caspase-3 的濃度呈比例關(guān)系。
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存)
96孔配置
48孔配置
配制
96/48人份酶標(biāo)板
1塊板(96T)
半塊板(48T)
即用型
塑料膜板蓋
1塊
半塊
即用型
標(biāo)準(zhǔn)品:40ng/ml
1瓶(0.6ml)
1瓶(0.3ml)
按說(shuō)明書進(jìn)行稀稀
空白對(duì)照
1瓶(1.0ml)
1瓶(0.5ml)
即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液
1瓶(4.0ml)
1瓶(2.0ml)
即用型
*標(biāo)記的抗caspase-3 抗體
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
親和鏈酶素-HRP
1瓶(8.0ml)
1瓶(4.0ml)
即用型
洗滌緩沖液
1瓶(20ml)
1瓶(10ml)
按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋
底物A
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
底物B
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
終止液
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
標(biāo)本稀釋液
1瓶(12ml)
1瓶(6.0ml)
即用型
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
40 ng/ml
(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
20 ng/ml
(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10 ng/ml
(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5.0 ng/ml
(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5 ng/ml
(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.25 ng/ml
(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0 ng/ml
(空白對(duì)照)
原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
建議使用的實(shí)驗(yàn)方案
標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)
A
40
40
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
B
20
20
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
C
10
10
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
D
5.0
5.0
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
E
2.5
2.5
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
F
1.25
1.25
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
G
0
0
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
H
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的caspase-3 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的caspase-3 含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測(cè)值范圍:0-40ng/ml
4、敏感度: 0.1 ng/ml
{試劑酶聯(lián)網(wǎng):www.shjgogo.com} ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品推薦:
人半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA試劑盒 Human galactose-6-sulphate sulphatase,Gal-6S ELISA試劑盒
人艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA試劑盒 Human iduronate sulfatase,IDS ELISA試劑盒
人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒 Human β-glucuronidase,βGD ELISA試劑盒
人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒 Human β-glucosidase ELISA試劑盒
人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒 Human β-lactamase ELISA試劑盒
人β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒 Human α mannosidase,α Manase ELISA試劑盒
人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒 Human α-galactosidase,αGAL ELISA試劑盒
人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒 Human α-L-iduronidase,IDUA ELISA試劑盒
人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒 Human α-L-iduronidase,IDUA ELISA試劑盒
人α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 Human α2-Antiplasmin,α2-AP ELISA試劑盒
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 Human N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA試劑盒
人L苯*解氨酶(PAL)ELISA試劑盒 Human L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA試劑盒
人5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 Human 5-Nucleotidase,5-NT ELISA試劑盒
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 Human 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA試劑盒
人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 Human Creatine Kinase,CK ELISA試劑盒
人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA試劑盒 Human targeted ribonuclease, TR ELISA試劑盒
人蛋白激酶C(PKC)ELISA試劑盒 Human protein kinase C,PKC ELISA試劑盒
人醛縮酶(ALD)ELISA試劑盒 Human Aldolase,ALD ELISA試劑盒
人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒 Human L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA試劑盒
人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)ELISA試劑盒 Human acid sphingomyelinase, ASM ELISA試劑盒
人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA試劑盒 Human arachidonate 5-lipoxygenase,ALOX-5 ELISA試劑盒
人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒 Human 5-lipoxygenase,5-LO/LOX ELISA試劑盒
人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA試劑盒 Human adenylyl cyclase 1,AC-1 ELISA試劑盒
人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA試劑盒 Human Soluble Adenylate Cyclase,sAC ELISA試劑盒
人*脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒 Human Ornithine decarboxylase,ODC ELISA試劑盒
人蛋白*激酶(PTK/CD115)ELISA試劑盒 Human protein tyrosine kinase,PTK ELISA試劑盒
人蛋白*磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA試劑盒 Human protein tyrosine phosphatase,PTP/PTPase ELISA試劑盒
人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA試劑盒 Human TNF α converting enzyme,TACE ELISA試劑盒
人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA試劑盒 Human Polymorphonuclear Elastase,PMN Elastase ELISA試劑盒
人*型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒 Human urokinase-type plasminogen activator,uPA/PLAU ELISA試劑盒
人*8(KLK 8)ELISA試劑盒 Human urokinase-type plasminogen activator,uPA/PLAU ELISA試劑盒
人*6(KLK 6)ELISA試劑盒 Human Kallikrein 6,KLK 6 ELISA試劑盒
人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA試劑盒 Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,FDA ELISA試劑盒
人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒 Human cathepsin D,cath-D ELISA試劑盒
人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒 Human hormone sensitive lipase,HSL ELISA試劑盒
人*(PK)ELISA試劑盒 Human pancreatickininogenase,PK ELISA試劑盒
人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒 Human aconitase 2,ACO-2 ELISA試劑盒
人26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA試劑盒 Human 26S proteasome,26S PSM ELISA試劑盒
人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒 Human Cyclin-dependent kinase 4,CDK-4 ELISA試劑盒
人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒 Human Placental alkaline pkosphatase,PLAP ELISA試劑盒
人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒 Human Placental alkaline pkosphatase,PLAP ELISA試劑盒
人受體*激酶(RTKs)ELISA試劑盒 Human receptor tyrosine kinase,RTKs ELISA試劑盒
人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒 Human mitogen activited protein kinase,MAPK ELISA試劑盒
人*(LZM)ELISA試劑盒 Human Lysozyme,LZM ELISA試劑盒
人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒 Human focal adhesion kinase,FAK ELISA試劑盒
人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA試劑盒 Human soluble Phospholipase A2,sPL-A2 ELISA試劑盒
人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒 Human deoxyribonuclease Ⅰ,DNase-Ⅰ ELISA試劑盒
人*酶(Arg)ELISA試劑盒 Human Arginase,Arg ELISA試劑盒
人*酶(Arg)ELISA試劑盒 Human Arginase,Arg ELISA試劑盒
人中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA試劑盒 Human neutrophilic alkaline phosphatase,NAP ELISA試劑盒
人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒 Human anapastic lymphoma kinase,ALK ELISA試劑盒
人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒 Human cytokinin MB,CKMB ELISA試劑盒
人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA試劑盒 Human myosin light chain kinase,MLCK ELISA試劑盒
人*硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)ELISA試劑盒 Human glutathione S-transferases,GSTpi ELISA試劑盒
人*S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)ELISA試劑盒 Human glutathione S-transferases,GSTs ELISA試劑盒
人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒 Human deubiquitinating enzyme,DUB ELISA試劑盒
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),環(huán)保在線對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。