本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：                                                          96T

30μmol/L -800μmol/L

使用目的：

本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中游離脂肪酸（FFA）含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠游離脂肪酸（FFA）水平。用純化的小鼠游離脂肪酸（FFA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入游離脂肪酸（FFA），再與HRP標記的游離脂肪酸（FFA）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的游離脂肪酸（FFA）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠游離脂肪酸（FFA）濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

標準品（1600μmol/L）

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×8條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張 

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

800μmol/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

400μmol/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

200μmol/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

100μmol/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

50μmol/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

操作程序總結(jié)：

計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

{試劑酶聯(lián)網(wǎng)：www.shjgogo.com}   ELISA試劑盒相關產(chǎn)品推薦：

豬內(nèi)皮素1（ET-1）ELISA試劑盒 Porcine endothelin 1,ET-1 ELISA試劑盒
豬免疫球蛋白M（IgM）ELISA試劑盒 Porcine Immunoglobulin M,IgM ELISA試劑盒
豬免疫球蛋白G（IgG）ELISA試劑盒 Porcine Immunoglobulin G,IgG ELISA試劑盒
豬免疫球蛋白E（IgE）ELISA試劑盒 Porcine Immunoglobulin E,IgE ELISA試劑盒
豬可溶性血管細胞粘附分子1（sVCAM-1）ELISA試劑盒 Porcine soluble Vascuolar cell adhesion molecules 1,sVCAM-1 ELISA試劑盒
豬巨噬細胞炎性蛋白1α（MIP-1α/CCL3）ELISA試劑盒 Porcine macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA試劑盒
豬角化細胞生長因子（KGF）ELISA試劑盒 Porcine Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA試劑盒
豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）ELISA試劑盒 Porcine tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA試劑盒
豬基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）ELISA試劑盒  Porcine matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA試劑盒
豬睪酮（T）ELISA試劑盒 Porcine Testoterone,T ELISA試劑盒
豬肝細胞生長因子（HGF）ELISA試劑盒 Porcine hepatocyte growth factor,HGF ELISA試劑盒
豬γ干擾素（IFN-γ）ELISA試劑盒  Porcine Interferon γ ,IFN-γ ELISA試劑盒
豬端粒酶（TE）ELISA試劑盒 Porcine omerase,TE ELISA試劑盒
豬促生長激素釋放激素（GHRH）ELISA試劑盒 Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA試劑盒
豬促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒 Porcine Follicle-stimulating hormone,FSH ELISA試劑盒
豬Ⅰ型前膠原羧基端肽（PⅠCP）ELISA試劑盒 Porcine Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA試劑盒
豬表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒 Porcine Epithelial growth factor,EGF ELISA試劑盒
豬白介素8（IL-8/CXCL8）ELISA試劑盒  Porcine interleukin 8,IL-8 ELISA試劑盒
豬白介素6（IL-6）ELISA試劑盒  Porcine Interleukin 6,IL-6 ELISA試劑盒
豬白介素4（IL-4）ELISA試劑盒 Porcine interleukin 4,IL-4 ELISA試劑盒
豬白介素3（IL-3）ELISA試劑盒 Porcine interleukin 3,IL-3 ELISA試劑盒
豬白介素2（IL-2）ELISA試劑盒 Porcine interleukin 2,IL-2 ELISA試劑盒
豬白介素1β （IL-1β）ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 1β,IL-1β ELISA試劑盒
豬白介素18（IL-18）ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 18,IL-18 ELISA試劑盒
豬白血病抑制因子受體（LIFR）ELISA試劑盒 Porcine leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA試劑盒
豬白介素10（IL-10）ELISA試劑盒  Porcine interleukin 10,IL-10 ELISA試劑盒
豬白介素1（IL-1）ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 1,IL-1 ELISA試劑盒
豬Ⅲ型前膠原肽（PⅢNP）ELISA試劑盒 Porcine N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA試劑盒
豬Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）ELISA試劑盒 Porcine Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA試劑盒
豬細胞間粘附分子2（ICAM-2/CD102）ELISA試劑盒 Porcine intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA試劑盒
豬細胞間粘附分子3（ICAM-3/CD50）ELISA試劑盒 Porcine intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA試劑盒
豬纖溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）ELISA試劑盒 Porcine plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA試劑盒
豬纖溶酶原激活物抑制因子（PAI）ELISA試劑盒 Porcine plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA試劑盒
豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物（FDP）ELISA試劑盒 Porcine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA試劑盒
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）ELISA試劑盒 Porcine thrombomodulin,TM ELISA試劑盒
豬血小板衍生生長因子（PDGF）ELISA試劑盒 Porcine plaet-derived growth factor,PDGF ELISA試劑盒
豬氧化低密度脂蛋白（OxLDL）ELISA試劑盒 Porcine oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA試劑盒
豬組織型纖溶酶原激活劑（t-PA）ELISA試劑盒 Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA試劑盒
豬組織因子（TF）ELISA試劑盒 Porcine Tissue factor,TF ELISA試劑盒
豬白介素1受體拮抗劑（IL1Ra）ELISA試劑盒  Porcine Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA試劑盒
豬高鐵血紅蛋白（MHB）ELISA試劑盒 Porcine Methemoglobin,MHB ELISA試劑盒
豬Ⅲ型前膠原氨基端肽（PⅢNT）ELISA試劑盒 Porcine procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA試劑盒
豬低分子肝素（LMWH）ELISA試劑盒 Porcine low molecular weight heparin,LMWH ELISA試劑盒
豬單核細胞增多性李斯特菌素O（（LLO）ELISA試劑盒 Porcine listeriolysin O,LLO ELISA試劑盒
雞極低密度脂蛋白（VLDL）ELISA試劑盒  Chicken very low density lipoprotein,VLDL ELISA試劑盒 
雞轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGF-β2）ELISA試劑盒 Chicken Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA試劑盒 
雞胰高血糖素（GC）ELISA試劑盒  Chicken Glucagon,GC ELISA試劑盒
雞甲狀腺素（T4）ELISA試劑盒 Chicken Thyroxine,T4 ELISA試劑盒
雞三碘甲狀腺原氨酸（T3）ELISA試劑盒 Chicken Tri-iodothyronine,T3 ELISA試劑盒
雞抗肌內(nèi)膜抗體IgA（EMA IgA）ELISA試劑盒  Chicken anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA試劑盒
雞核因子κB（NF-κB）ELISA試劑盒 Chicken Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA試劑盒
雞弓形蟲循環(huán)抗原（TCA）ELISA試劑盒 Chicken toxoplasma circulating antigen,TCA ELISA試劑盒