本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：                                                          96T

0.1pmol/L -5pmol/L

使用目的：

本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰高血糖素樣肽1（GLP-1）含量。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰高血糖素樣肽1（GLP-1）水平。用純化的小鼠胰高血糖素樣肽1（GLP-1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰高血糖素樣肽1（GLP-1），再與HRP標記的胰高血糖素樣肽1（GLP-1）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰高血糖素樣肽1（GLP-1）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠胰高血糖素樣肽1（GLP-1）濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

標準品（8pmol/L）

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×8條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張 

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

4pmol/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

2pmol/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

1pmol/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

0.5pmol/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

0.25 pmol/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

操作程序總結(jié)：

計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

{試劑酶聯(lián)網(wǎng)：www.shjgogo.com}   ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品推薦：

雞甲狀旁腺激素（PTH）ELISA試劑盒 Chicken Parathyroid hormone,PTH ELISA試劑盒 
雞卵黃免疫球蛋白（IgY）ELISA試劑盒 Hen egg Immunoglobulin of Yolk,IgY ELISA試劑盒
雞蛋卵黃高磷蛋白磷酸肽（PPP）ELISA試劑盒 Hen egg phosvitin phosphopeptides,PPP ELISA試劑盒
雞脂多糖/內(nèi)毒素（LPS）ELISA試劑盒 Chicken Lipopolysaccharides,LPS ELISA試劑盒
雞β干擾素（IFN-β/IFNB）ELISA試劑盒  Chicken Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA試劑盒 
雞免疫球蛋白E（IgE）ELISA試劑盒 Chicken Immunoglobulin E,IgE ELISA試劑盒
雞免疫球蛋白A（IgA）ELISA試劑盒  Chicken Immunoglobulin A,IgA ELISA試劑盒
雞腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA試劑盒 Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA試劑盒 
雞白介素1β（IL-1β）ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 1β,IL-1β ELISA試劑盒
雞主要組織相容性復(fù)合體（MHC/B）ELISA試劑盒 Chicken major histocompatibility complex,MHC/B ELISA試劑盒 
雞熱休克蛋白70（HSP-70）ELISA試劑盒  Chicken Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA試劑盒 
雞白痢抗體檢測（PD）ELISA試劑盒  Chiken Pullorum Diseaes,PD ELISA試劑盒
雞分泌型免疫球蛋白A（SIgA）ELISA試劑盒 Chicken secretory immunoglobulin A,SIgA ELISA試劑盒
雞α干擾素（IFN-α）ELISA試劑盒  Chicken Interferon α,IFN-α ELISA試劑盒
雞白介素18（IL-18）ELISA試劑盒  Chicken Interleukin 18,IL-18 ELISA試劑盒
雞白介素1（IL-1）ELISA試劑盒  Chicken Interleukin 1,IL-1 ELISA試劑盒
雞病毒性腸炎病毒（DEV）ELISA試劑盒  Chicken virus enteritis,DEV ELISA試劑盒
雞肌紅蛋白（MYO/MB） ELISA試劑盒 Chicken Myoglobin,MYO/MB ELISA試劑盒 
雞白介素9（IL-9）ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 9,IL-9 ELISA試劑盒 
雞白介素3（IL-3）ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 3,IL-3 ELISA試劑盒 
雞白血病抑制因子（LIF）ELISA試劑盒  Chicken Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA試劑盒 
雞轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）ELISA試劑盒  Chicken Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA試劑盒 
雞C反應(yīng)蛋白（CRP）ELISA試劑盒  Chicken C-Reactive Protein,CRP ELISA試劑盒 
雞血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）ELISA試劑盒  Chicken Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA試劑盒 
雞免疫球蛋白G（IgG）ELISA試劑盒  Chicken Immunoglobulin G,IgG ELISA試劑盒 
雞堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）ELISA試劑盒  Chicken basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA試劑盒 
雞可溶性細胞間粘附分子1（sICAM-1）ELISA試劑盒 Chicken Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA試劑盒 
雞可溶性E選擇素（sE-selectin）ELISA試劑盒  Chicken soluble E-selectin,sE-selectin ELISA試劑盒 
雞表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒  Chicken Epidermal growth factor,EGF ELISA試劑盒 
雞胰島素樣生長因子1（IGF-1）ELISA試劑盒  Chicken Insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA試劑盒 
雞生長激素（GH）ELISA試劑盒  Chicken growth hormone,GH ELISA試劑盒 
雞乙酰乙酸檢測（ACAC）ELISA試劑盒 Chicken Acetoacetic acid,ACAC ELISA試劑盒 
雞傳染性鼻炎抗體（IC）ELISA試劑盒 Chicken infectious coryza,ic ELISA試劑盒
雞透明質(zhì)酸（HA）ELISA試劑盒 Chicken Hyaluronic acid,HA ELISA試劑盒
雞硫酸類肝素（HS）ELISA試劑盒 Chicken heparan sulfate,HS ELISA試劑盒 
雞催乳素（PRL）ELISA試劑盒 Chicken prolactin,PRL ELISA試劑盒
雞白血病病毒抗原（ALV-AG）ELISA試劑盒 Chicken Avian Leukosis Virus AG,ALV-AG ELISA試劑盒
雞促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒 Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA試劑盒 
雞促黃體激素（LH）ELISA試劑盒 Chicken Luteinizing Hormone,LH ELISA試劑盒
雞γ干擾素（IFN-γ）ELISA試劑盒  Chicken Interferon γ ,IFN-γ ELISA試劑盒 
雞白介素6（IL-6）ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 6,IL-6 ELISA試劑盒