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補(bǔ)體C3在血清血漿中的檢測及應(yīng)用
補(bǔ)體(Complement)主要分布在人和動物的體液和細(xì)胞表面,活化后有生物活性,并可介導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)的一組蛋白質(zhì),又稱為補(bǔ)體系統(tǒng)。
補(bǔ)體系統(tǒng)由近40種成分組成,大部分都是糖蛋白。補(bǔ)體的固有成分有13類,調(diào)節(jié)蛋白有10類;補(bǔ)體受體10多種。
補(bǔ)體不耐熱,當(dāng)溫度達(dá)到56度,時(shí)間達(dá)到30分鐘時(shí)大部分補(bǔ)體會失活。補(bǔ)體不易保存,冷凍干燥,保存時(shí)間相對長一些。
補(bǔ)體第三組分(Complement Component 3,C3)是補(bǔ)體的核心成分,分子量為195000,由19號染色體C3基因編碼。C3是血液中含量zui大的補(bǔ)體成分,主要由巨噬細(xì)胞和肝臟合成。C3在補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑和旁路激活途徑中都有*的作用,可裂解成C3a和C3b兩個(gè)片段。
針對C3,開發(fā)了重組的C3蛋白,可用于SDS-PAGE;WB; ELISA; IP等實(shí)驗(yàn)中;多克隆抗體,生物素標(biāo)記的多克隆抗體,以及Elisa檢測試劑盒。
使用的免疫原是Ser23~Glu266,該試劑盒的檢測范圍為7.813-500ng/mL,靈敏度為2.8ng/mL。在試劑盒內(nèi)部開發(fā)過程中,我們也會檢測不同樣本中C3的含量,根據(jù)內(nèi)部實(shí)驗(yàn)結(jié)果,血液樣本檢測需要稀釋20000倍,C3的濃度為0.618~6.067mg/ml,也有極個(gè)別低值,樣本背景不詳。
檢測血液中的C3,建議采用血清樣本。因?yàn)檠獫{樣本經(jīng)過抗凝后,里面的一些纖維蛋白原可能會干擾檢測。
檢測血液中的C3具有重大臨床意義。某些急性炎癥或者傳染病早期,如心肌炎、心肌梗死、關(guān)節(jié)炎等;在另外一些疾病如肝硬化,急性腎小球腎炎早期及晚期,急性腎小球腎炎早期及晚期,C3的含量都會發(fā)生顯著波動。故補(bǔ)體動態(tài)變化在臨床監(jiān)測上越來越重要。
同時(shí)尿中的C3檢測其實(shí)也有臨床意義。常規(guī)情況下尿液中不含有C3,但是當(dāng)腎小球疾病時(shí),因毛細(xì)血管壁增厚、變形、斷裂、結(jié)構(gòu)破壞,通透性增高,尿液內(nèi)可出現(xiàn)C3。故檢測腎臟方面的疾病時(shí),尿中C3的含量可作為診斷參考。
綜上所述,血液和尿液等體液中C3的含量檢測對于許多疾病,如肝炎,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,腎臟等疾病中有重要意義。
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