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制作細胞劃痕實驗需要注意事項2025/3/11
傷口愈合試驗，也通常稱為“劃痕試驗”，是一種廣泛建立的研究體外集體細胞遷移的技術(shù)。細胞劃痕（WoundHealing)是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。其實驗原理是，當(dāng)細...
細胞傳代技術(shù)操作步驟2025/3/3
細胞傳代技術(shù)操作步驟：1、紫外照射滅菌后，我們應(yīng)該穿好滅菌服，戴好滅菌手套和口罩。2、從培養(yǎng)箱取出細胞培養(yǎng)瓶（一般選擇處于對數(shù)期的細胞），用酒精噴壺在培養(yǎng)瓶表面噴灑75%酒精消毒，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶到超凈臺。...
ELISA檢測方法優(yōu)缺點分述2025/2/26
ELISA檢測主要方法有直接法、間接法、雙抗體夾心法和競爭法。1、直接法（directELISA）將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢：...
類器官蛋白提取方法2025/2/24
類器官蛋白提取方法：一、試劑準備（細胞漿、細胞核及細胞膜蛋白抽提試劑盒）1、準備溶液1）室溫融解試劑盒中的各種溶液，溶解后除結(jié)構(gòu)蛋白提取液外，其他試劑立即置于冰上；2）結(jié)構(gòu)蛋白提取液溶解后，可放置于3...
細胞凍存實驗操作流程2025/2/20
實驗原理：隨著溫度降低，細胞內(nèi)的酶活性會逐漸降低，到-70℃左右，酶活性幾乎為0，代謝活動停止，可以實現(xiàn)長期保存。然而，隨著溫度降低，細胞內(nèi)外的水分也會“結(jié)冰"并形成冰晶，冰晶能導(dǎo)致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷...
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù)詳細介紹2025/2/17
酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡寫ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法...
抗體的主要功能作用有哪些？2025/2/10
抗體（antibody,Ab）是由效應(yīng)B細胞（效應(yīng)淋巴B細胞）分泌，機體用于抵御外來物質(zhì)，如病毒，細菌等抗原，結(jié)構(gòu)呈“Y"字型的球狀蛋白質(zhì)，僅僅存在于脊椎動物的血液和B淋巴細胞膜表面。凡是能夠跟抗體結(jié)...
原代細胞如何分離和培養(yǎng)？2025/2/5
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，...
ELISA試驗手工洗滌介紹2025/1/20
洗滌在ELISA試驗過程中雖不是一個反應(yīng)步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA試驗就是靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反...
ELISA檢測過程陰性對照（品）簡述2025/1/13
陰性對照（品）：1、陰性對照（品）的概念與要求：所謂陰性對照（品），應(yīng)當(dāng)是本項檢測試驗中采用與待撿物（樣品、人用試劑就是人的血清等）具有同源性和同質(zhì)性，又不含有待檢物質(zhì)，并能客觀比較和鑒別處理因素（血...
聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）引物的作用歸納2025/1/6
PCR(聚合酶鏈反應(yīng))是一種常用的分子生物學(xué)技術(shù)，可用于擴增DNA序列。在PCR反應(yīng)中，引物是起關(guān)鍵作用的短鏈DNA分子，它們會與待擴增DNA序列的兩端匹配，指示聚合酶在這些位置開始復(fù)制DNA。引物在...
影響ELISA試劑盒質(zhì)量因素小結(jié)2024/12/23
ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實驗中比較常見的問題，下面小結(jié)影響ELISA試劑盒質(zhì)量事項。1、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量全一致，即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差...
ELISA雙抗夾心法具體操作步驟2024/12/17
ELISA雙抗夾心法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經(jīng)洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應(yīng)抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結(jié)合，經(jīng)保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，...
細胞培養(yǎng)無菌操作關(guān)鍵點2024/12/9
細胞培養(yǎng)最看重的就是無菌操作，無菌操作是細胞培養(yǎng)是否成功的關(guān)鍵點。1、使用前用75%的乙醇擦拭細胞間的桌面、超凈臺、孵箱和離心機等；紫外照射細胞間和超凈臺30分鐘以上才可以進入使用。2、進入細胞間必須...
PCR檢測試劑盒反應(yīng)設(shè)計引物詳解2024/12/2
PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素：參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任...
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