用非選擇性培養(yǎng)基對牛乳、土壤、水和食品等含有混合微生物的樣品進行計數(shù)時， 常需要估算平板上生長的不同種類的微生物的相對數(shù)量。然后就可以計算出存在于原始樣品中各種微生物的分布百分比。若不加控制地從培養(yǎng)皿中挑選菌落不能獲得代表 性的菌落,現(xiàn)已有多種方法可獲得真正隨機的菌落。在這些操作中，應(yīng)該注意到那些可 能會被*忽視但卻十分重要的菌體組成.例如，在10⁷的假單胞菌中有10⁷的氣單胞菌，即在平均100個被檢菌落中僅僅會發(fā)現(xiàn)一個氣單胞菌菌落。特定的菌落的選擇 方法取決于所需檢測的菌落數(shù)和存在于分離平板上的菌落數(shù)目。常用的選擇方法 如下：

方法1

選擇平板上的每一個菌落。這個方法獲得的數(shù)量與被檢菌落數(shù)目大致相等。

方法2

選擇扇形區(qū)段和相對扇形區(qū)的每一個菌落。幾種劃分扇區(qū)的方法：

1.用油性記號筆在平板的表面劃分扇區(qū)(如分四個區(qū)>。

2.將平板放在哈里遜板上，標記適當?shù)纳葏^(qū)或菌落。哈里遜在研究奶酪中的細菌數(shù)和細菌類型時設(shè)計了哈里遜板。它能夠很方便地從少量供試的菌落中 獲得有代表性的菌落

將要檢測的培養(yǎng)皿同心地放在板上。首先選擇標記有1的區(qū)域中的所有菌落進行檢測。如果得不到足夠的數(shù)目，選擇標記有“2”的區(qū)域的所有菌落。如果有必要可以繼續(xù) 選擇“3”、“4”區(qū)域中的菌落，直到達到所需的菌落數(shù)。一旦開始對標記了序號的扇區(qū)開始計數(shù)，必須把這些扇區(qū)全部記完。所有在標記線上的菌落可忽略不記。

方法3：復制平板

如果平板表面已接種，可以用復制工具轉(zhuǎn)移所有的菌落。zui簡單的復制工具是無菌棉絨墊。它是在一個直徑比平皿略小的合適的圓柱體(如合金圓柱體)一端的平面上平放一張火菌的棉絨墊(高壓后快速臧少壓力以保 證平絨墊的干燥)而制成。將其輕輕壓在培養(yǎng)基表面，壓住菌落，取出后連續(xù)輕輕壓在幾個準備好的滅菌的適當培養(yǎng)基上，zui后壓在對照培養(yǎng)基上檢查轉(zhuǎn)移是否成功。通常需要 轉(zhuǎn)移9個平板加1個對照。釆用這種方法可以問時檢測每一個菌落的多種生理特性。如 果要重新使用用過的平絨布，應(yīng)將其放到一個裝水的容器中。高II消毒，清除污染，再經(jīng)洗滌、漂洗、干燥、梳理后迸行高壓滅菌。