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1 一般要求
使用螺旋接種儀將樣品接種在平板上。樣品接種后,菌落即分布在螺旋軌跡上,隨半徑的增加分布得越來越稀。采用特殊的計(jì)數(shù)柵格,自平板外周向*對(duì)平皿上的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),即可得到樣品中微生物的數(shù)量。
2 實(shí)驗(yàn)步驟
取制備好的適宜稀釋度的樣品稀釋液,以選定的模式接種于實(shí)驗(yàn)所用平板,每個(gè)稀釋度接種兩塊平板,接種每一個(gè)樣品前后均按儀器設(shè)定程序?qū)β菪臃N儀進(jìn)行清洗消毒。
按相同接種模式接種懸浮液作為空白對(duì)照。
將平板按標(biāo)準(zhǔn)方法中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度進(jìn)行培養(yǎng)后,計(jì)數(shù)每個(gè)平板菌落數(shù),并記錄下來。
3 菌落總數(shù)的計(jì)算和記錄
平板上菌落數(shù)符合菌落計(jì)數(shù)儀規(guī)定計(jì)數(shù)范圍的為合適范圍。如果兩個(gè)稀釋度的四個(gè)平板菌落數(shù)均在合適范圍內(nèi),則將四個(gè)平板菌落數(shù)的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù);如果只有一個(gè)稀釋度的兩個(gè)平板菌落數(shù)在合適范圍內(nèi),則將這兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù)。
當(dāng)?shù)拖♂尪鹊膬蓚€(gè)平板菌落數(shù)都少于合適范圍的下*,計(jì)算這一稀釋度兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù)。給這個(gè)數(shù)注上星號(hào)(*),表明該數(shù)是從菌落數(shù)在計(jì)數(shù)范圍之外的平板估計(jì)所得。當(dāng)所有平板上的菌落數(shù)都超過合適范圍的上*,計(jì)算高稀釋度兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù),給這個(gè)數(shù)注上星號(hào)(*)。如果所有稀釋度的平板都沒有菌落,則以小于1乘以稀釋倍數(shù)和接種體積作為每克(毫升)樣品中的菌落數(shù),給這個(gè)數(shù)注上星號(hào)(*)。
記錄時(shí),只有在換算到每克(毫升)樣品中的菌落數(shù)時(shí),才能定下兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)字采用四舍五入的方法記錄。也可將樣品的菌落數(shù)記錄為10的指數(shù)形式。
4 結(jié)果的表述
根據(jù)F.3歸檔計(jì)算出每克(毫升)樣品的菌落數(shù),固體樣品以CFU/g為單位,液體樣品以CFU/mL為單位。
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