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產品名稱:豬藍耳病毒(歐洲株)核酸檢測試劑盒品牌
規(guī)格:48T/盒
類別:熒光-PCR法
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標:點擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項:
①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
4-氯-3-基啶 瓶 2V6. 低溫運輸和保存
三異丙基硅基乙炔 瓶 35. 低溫運輸和保存
2-羥苯硼 瓶 3T3-L 低溫運輸和保存
5-氨基-2-氯甲 瓶 3T3-Swiss albino 低溫運輸和保存
5-溴水楊 瓶 3T3 低溫運輸和保存
5-氨基水楊 瓶 3T6-Swiss albino 低溫運輸和保存
2,5-二基硝苯 瓶 479 低溫運輸和保存
4-氯-2-硝基甲苯 瓶 4647 低溫運輸和保存
3-溴苯硼 瓶 4T 低溫運輸和保存
3-溴苯胺 瓶 5637 低溫運輸和保存
3-硝基-4-氯甲苯 瓶 6T-CEM 低溫運輸和保存
紅色GL/4-基-2-硝苯胺 瓶 786-O 低溫運輸和保存
乙基三苯基 瓶 7WCY.0 低溫運輸和保存
2,4-二甲氧基嘧啶-5-硼 瓶 7WD0 低溫運輸和保存
4-溴-3-硝苯甲 瓶 7WML6.0 低溫運輸和保存
豬藍耳病毒(歐洲株)核酸檢測試劑盒品牌MUC5B 小鼠粘蛋白/粘液素5B 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:50mg
Cobra venom factor,CVF 毒蛇因子 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:00mg
sCD38(Soluble Cluster of differentiation 38) 人可溶性CD38 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:00mg
CR2/sCD2(Soluble Cluster of differentiation 2) 人可溶性CD2 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:00mg
PACAP 小鼠垂體腺苷環(huán)化酶激活肽 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:00mg
CHOP 人內質網(wǎng)應激相關蛋白CHOP 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:50mg
(MAG Ab) 大鼠抗髓鞘相關糖蛋白抗體 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:00mg
LH (Rabbit luteotropic hormone) 兔子促黃體激素 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:50mg
sLR(Leptin Soluble Receptor) 人可溶性瘦素受體 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:00mg
Bombyx mori Livetin,LT 家蠶卵黃蛋白 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:00mg
ABAb (Rabbit anti-brain tissue antibody) 兔抗腦組織抗體 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:50mg
(CTX- I ) 大鼠Ⅰ型膠原C端肽 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:50mg
PSGL-/CD62 小鼠抗PSGL-/CD62 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:50mg
TLR-9/CD289(Toll-like receptor 9) 人Toll樣受體9 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:50mg
(pIKB Alpha) 大鼠磷化核因子κB抑制蛋白α 進口/國產常溫,避光 規(guī)格:00mg
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