高壓蒸氣滅菌法是一種迅速而有效的滅菌方法。使用高壓蒸氣滅菌器，利用加熱產(chǎn)生蒸氣，隨著蒸氣壓力不斷增加，溫度隨之升高，通常壓力在103.4kPa(相當(dāng)舊制的15磅/吋2或1.05kg/cm2)時，器內(nèi)溫度可達(dá)121.3℃，維持15～30min，可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物。此法常用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械及敷料等耐濕和耐高溫物品的滅菌。
　　
　　高壓蒸汽滅菌法的注意事項(xiàng)：
　　
　　*，無菌包不宜過大（小于50cm×30cm×30cm），不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹*。消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通。而且排氣時使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。消毒滅菌完畢，關(guān)閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態(tài)。
　　
　　第二，布類物品應(yīng)放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸汽進(jìn)入包裹*，嚴(yán)重影響滅菌效果。
　　
　　第三，定期檢查滅菌效果。經(jīng)高壓蒸汽滅菌的無菌包、無菌容器有效期以1周為宜。高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測：有以下三種方法。
　　
　　*種是工藝監(jiān)測，又稱程序監(jiān)測。根據(jù)安裝在滅菌器上的量器（壓力表、溫度表、計時表）、圖表、指示針、報警器等，指示滅菌設(shè)備工作正常與否。此法能迅速指出滅菌器的故障，但不能確定待滅菌物品是否達(dá)到滅菌要求。此法作為常規(guī)監(jiān)測方法，每次滅菌均應(yīng)進(jìn)行。
　　
　　第二種是化學(xué)指示監(jiān)測。利用化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時間條件下受熱變色或變形的特點(diǎn)，以判斷是否達(dá)到滅菌所需參數(shù)。常用的有：
　　
　　自制測溫管：將某些化學(xué)藥物的晶體密封于小玻璃管內(nèi)（長2cm,內(nèi)徑1～2mm）制成。常用試劑有苯甲酸（熔點(diǎn)121－123℃）等。滅菌時，當(dāng)濕度上升至藥物的熔點(diǎn)，管內(nèi)的晶體即熔化，事后，雖冷卻再凝固，其外形仍可與未熔化的晶體相區(qū)別，此法只能指示溫度，不能指示熱持續(xù)時間是否已達(dá)標(biāo)，因此是zui低標(biāo)準(zhǔn)。主要用于各物品包裝的中心情況的監(jiān)測。
　　
　　3M壓力滅菌指示膠帶：此膠帶上印有斜形白色指示線條圖案，是一種貼在待滅菌的無菌包外的特制變色膠紙。其粘貼面可牢固地封閉敷料包、金屬盒或玻璃物品，在121℃經(jīng)20分鐘，130℃經(jīng)4分鐘后，膠帶100％變色（條紋圖案即顯現(xiàn)黑色斜條）。3M膠帶既可用于物品包裝表面情況的監(jiān)測，又可用于對包裝中心情況的監(jiān)測，還可以代替別針，夾子或帶子使用。
　　
　　第三種是生物指示劑監(jiān)測。利用耐熱的非致病性細(xì)菌芽胞作指示菌，以測定熱力滅菌的效果。菌種用嗜熱脂肪桿菌，本菌芽胞對熱的抗力較強(qiáng)，其熱死亡時間與病原微生物中抗力zui強(qiáng)的肉毒桿菌芽胞相似。生物指示劑有芽胞懸液、芽胞菌片以及菌片與培養(yǎng)基混裝的指示管。檢測時應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包，每個包中心部位置生物指示劑2個，放在滅菌柜室的5個點(diǎn)，即上、中層的*各一個點(diǎn)，下層的前、中、后各一個點(diǎn)。滅菌后，取出生物指示劑，接種于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，置55－60℃溫箱中培養(yǎng)48小時至7天，觀察zui終結(jié)果。若培養(yǎng)后顏色未變，澄清透明，說明芽胞已被殺滅。達(dá)到了滅菌要求。若變?yōu)辄S色混濁，說芽胞未被殺滅，滅菌失敗