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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

?小鼠心臟纖維原細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠心臟纖維原分離自心臟組織；心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成，非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%，其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形，胞質較少，弱嗜酸性，胞核小，染色深。電鏡下可見，細胞中粗面內(nèi)質網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達。當組織受損時，纖維細胞可轉化為成纖維細胞而參與修復過程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細胞，如在組織損傷后的修復過程中，纖維細胞可轉化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小，呈多角形，胞質較少，弱嗜酸性，胞核亦較小，染色較深，電鏡下粗面內(nèi)質網(wǎng)較少，高爾基復合體不發(fā)達。成纖維細胞較大，呈星形或梭形，有突起，細胞核呈卵圓形，染色質稀疏，染色淡，核仁明顯，胞質較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖，形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成，當心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中常見的細胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細胞可重新轉變?yōu)橛字傻某衫w維細胞，其功能活動也得以恢復，參與組織損傷后的修復。因此，對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現(xiàn)代心血管領域研究的一個重點。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠心臟纖維原經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠心臟纖維原采用膠原酶消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠膠原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒

Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor,KIRELISAKit 人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(低多糖/酚)50次

Humanα1-Acidglycoprotein，α1-AGPELISAKit人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅸ(FⅨ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠早老素1(PSEN1)ELISA試劑盒 ，英文名： PSEN1 ELISA Kit

Mouse lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 小鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒

MouseIerleukin3,IL-3ELISAKIT 小鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit人胃腸癌標志物CA199規(guī)格：48T/96T

細胞/組織mRNA直接化試劑盒10次

ELISAKitTIMP-4大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4規(guī)格：48T/96T

PF4重組人 CXCL4 / PF4 蛋白 Protein

腦型脂肪酸結合蛋白(FABP7)重組蛋白 Recombinant Fatty Acid Binding Protein 7, Brain (FABP7)

ANXA8重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 (His 標簽) Protein

EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (His 標簽)

NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (His 標簽)

小鼠心臟纖維原細胞腦型脂肪酸結合蛋白(FABP7)重組蛋白 Recombinant Fatty Acid Binding Protein 7, Brain (FABP7)

EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (His 標簽)

PF4重組人 CXCL4 / PF4 蛋白 Protein

NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (His 標簽)

ANXA8重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。