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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測(cè)試劑盒>> 50T耐腸球菌PCR檢測(cè)試劑盒
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產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-11-13 13:32:09瀏覽次數(shù):145次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線產(chǎn)品名稱:耐腸球菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:VancomycinResistant Enterococcus(VRE)PCR
編號(hào):XG-P2249
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號(hào) | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對(duì)照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊(cè) | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
TryptoseBrothBase
MacCONKEY agar 麥康凱瓊脂 1.05465.0500 MERCK默克 incubation media MacCONKEY agar 麥康凱瓊脂 1.05465.0500 MERCK默克
含鐵牛奶培養(yǎng)基 250g 用于飲用天然礦泉水中產(chǎn)氣莢膜梭菌的測(cè)定。(GB/T 8538-2008)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基Mouseembryonicfibroblastsintothemedium
營養(yǎng)瓊脂(NA) 250g 細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用二苯偶氮碳酰肼(>60%(HPLC)) 進(jìn)口分裝 mRTEC, 小鼠小管上皮細(xì)胞
氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.5000mol/L(0.5N)) 進(jìn)口分裝 Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
乙酰苯胺(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口分裝 人前列腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基
銨標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) 進(jìn)口分裝 人腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基TLK2 Others Human 人 TLK2 / PKU-ALPHA (aa 397-772 ) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
過氧化物酶分析試劑盒GPX
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM]
CBRH-7919細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 人未分化胃癌細(xì)胞,HGC-27細(xì)胞 牛陀螺狀細(xì)胞;BT
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5
SFTPD Others Mouse 小鼠 SFTPD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
耐腸球菌PCR檢測(cè)試劑盒蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Bacillusthuringiensissubsp.galleriae
哈氏弧菌
蕁麻青霉
假單胞桿菌
冰核細(xì)菌
長根菇(長根奧德磨)NUCLEASELIMINATORPUMP去除核酸酶噴劑生物技術(shù)級(jí)1 PumpRT
497-19-8碳酸鈉;純堿wo7ium te Anxy7nous (AS);
Ferrictartrate鐵(III)250克3N
鷹嘴豆芽素A標(biāo)準(zhǔn)品 Biochanin A,98% 491-80-5 50MG 通用試劑
羊抗馬IgG (HRP標(biāo)記) Anti-Horse IgG-HRP antibody produced i... Null 0.2ML HRP酶標(biāo)抗體TNFRSF17 Others Rat 大鼠 TNFRSF17 / BCMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞HBMEC
大鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
V79倉鼠肺細(xì)胞 V79 hamster lung cells RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS
FGF18 Protein Mouse 重組小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Calu-6(人肺退行性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞HPrMEC
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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